Как проводится и что показывает иммуноферментный анализ?

Осмысление метода иммуноферментного анализа возможно благодаря пониманию реакции «антиген — антитело». Непригодные для организма молекулы, зачастую белкового происхождения, которые могут попасть в инфицированный организм, называются антигенами. Кроме того, частицы крови, не совпадающие с собственной группой, также могут являться антигенами. В свою очередь, антигены могут вызвать иммунную реакцию, направленную на защиту внутренней среды человека от неизвестных веществ. Процесс реакции «антиген — антитело» заключается в синтезе антител (иммуноглобулины) организмом, которые могут связаться с антигеном, образовав иммунный комплекс. Клетки иммунной системы легче распознают такие комплексы и уничтожают их.

Обзор основных показателей

Один из способов определить наличие инфекционного процесса в организме - это анализ на наличие класса иммуноглобулинов. Существует несколько видов иммуноглобулинов, которые можно использовать для анализа заболевания: IgM, IgA и IgG.

Присутствие IgM свидетельствует о наличии острого инфекционного процесса в организме. Если IgM не выявлено, это может указывать на то, что в организме отсутствует конкретный возбудитель, либо же инфекция перешла в хроническую стадию.

Если результат теста на IgM отрицательный, а уровень IgA повышен, это обычно свидетельствует о реинфекции, хроническом или скрыто протекающем заболевании.

Если же обнаружены оба класса иммуноглобулинов - IgM и IgA, это может указывать на разгар острого периода заболевания.

Наличие IgG может говорить о хронизации заболевания, либо о том, что организм выработал иммунитет к инфекционному агенту и начал выздоравливать.

Выводы о состоянии здоровья человека следует делать на основе результатов всего комплекса анализов и сведений о состоянии здоровья в целом.

Возможные результаты ИФА

В сданном на анализ образце, ИФА может выявить наличие или отсутствие антител и антигенов в зависимости от того, какая информация была указана в заполненном бланке. Результаты могут быть представлены в виде таблицы, где все антитела и антигены будут перечислены с обозначением отрицательной или положительной реакции, или в виде количественного значения. В последнем случае будет указано количество содержащихся антител в данном образце.

Еще одним количественным показателем может быть индекс авидности антител, выраженный в процентах. Этот показатель определяет, сколько времени прошло с начала инфекционного процесса. Чем выше этот индекс, тем больше времени прошло с момента инфицирования.

Сегодня разрабатываются тысячи различных тест-систем ИФА, которые позволяют обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных заболеваниях. Поэтому, ИФА широко используется в медицине для диагностики большинства патологических состояний. Простой и быстрый анализ помогает назначить правильную терапию для эффективного лечения заболевания.

Классификация антител и их роль в иммунном ответе

Антитела являются важной частью иммунной системы человека. Они играют ключевую роль в противостоянии инфекционным заболеваниям, благодаря способности связываться с антигенами - веществами, вызывающими иммунный ответ. Существует несколько видов антител, каждое из которых активизируется на своей стадии иммунного ответа.

Первыми проявляются иммуноглобулины класса M (IgM) - самые крупные молекулы антител. Их содержание в крови резко возрастает на ранней стадии инфекции. За ними следует появление иммуноглобулинов класса G (IgG), которые помогают к организму начать уничтожение антигенов, а также продолжают циркулировать после болезни, обеспечивая иммунитет от повторного заражения.

Кроме того, в состав антител входят иммуноглобулины класса A (IgA), которые находятся в большом количестве в слизистых оболочках организма и представляют собой первую линию защиты от инфекций, а также иммуноглобулины класса E (IgE), которые играют важную роль в борьбе с паразитарными инфекциями и аллергическими реакциями.

Для лабораторной диагностики в основном используются IgM, IgG и IgA. Концентрация каждого из этих видов антител позволяет судить о том, на какой стадии находится инфекционный процесс и было ли у человека ранее данное заболевание (к примеру, краснуха или ветряная оспа). Благодаря прививкам, которые содержат ослабленные антигены микробов и вирусов, появляется большое количество IgG в крови, что при контакте с реальной угрозой быстро подавляет инфекцию до того, как она нанесет вред здоровью.

Зачем нужен иммуноферментный анализ?

Если врач подозревает, что за заболевание отвечает конкретная инфекция или планирует проверить уровень определенного гормона, то ему необходимо назначить пациенту иммуноферментный анализ. Это исследование помогает выявить наличие антигенов и антител в организме человека.

В лабораторных условиях иммунная реакция «антиген - антитело» может быть воссоздана путем использования уже готовых антигенов или антител для определения наличия в соответствующем образце связующих соединений.

Для начала, в лаборатории необходимо получить образец биологической жидкости — обычно это сыворотка крови. Затем используются пластиковые планшеты с лунками, которые содержат очищенные антигены предполагаемого возбудителя (или антитела в случае, если ищут антиген). Образцы помещаются в лунки, где происходит процесс образования иммунных комплексов. Если связующее соединение образуется, особое красящее вещество вступает в ферментную реакцию, и результаты анализа оцениваются по оптической плотности при помощи инструментального метода.

ИФА имеет две формы — качественный и количественный. В первом случае можно получить однозначный ответ: найдено искомое вещество в образце, или нет. В случае количественного анализа, более сложная цепь реакций позволяет оценить концентрацию антител в крови пациента, что сравнивается с результатами предыдущих тестов и может помочь выявить стадию инфекционного процесса.

Интересная информация

Предшественником иммуноферментного анализа был радиоиммунный анализ, в котором были использованы меченые антитела и антигены для индикации успешной реакции. Однако, проведение такого анализа представляло потенциальный риск для здоровья сотрудников лаборатории, поэтому ученые начали искать безопасную альтернативу. Именно так в 1971 году был изобретен иммуноферментный анализ (ИФА).

Какие плюсы имеет иммуноферментный анализ?

Иммуноферментный анализ (ИФА) применяется в лабораторной диагностике и имеет несколько преимуществ, которые делают его более точным и эффективным для выявления заболеваний. Вот некоторые из них:

• Высокая чувствительность. ИФА позволяет обнаружить искомое вещество, даже если его концентрация в образце очень низкая.
• Высокая специфичность. Диагностика с помощью ИФА безошибочная - если результат положительный, значит, найдены именно те антитела или антигены, которые предполагались, а не другие.
• Раннее выявление заболевания. ИФА заменил бактериологический метод диагностики, который был достаточно затратным и сложным. Определение IgM с помощью ИФА позволяет точно диагностировать заболевание уже в первые дни его проявления.
• Минимальный процент ошибок. Использование иммуноферментного анализа минимизирует влияние человеческого фактора, что снижает вероятность ошибки. Результат анализа считается точным, так как большинство тестовых систем и реактивов для ИФА производятся в промышленных условиях.

Поиск определенных заболеваний с помощью иммуноферментного анализа (ИФА) может иметь определенные недостатки. Для того, чтобы ИФА был эффективным, врач должен иметь предположения о природе заболевания, из-за этого часто не имеет смысла назначать тест в надежде случайно угадать диагноз.

Когда дело касается инфекционных заболеваний, ИФА может не способен найти возбудитель и не сможет определить его уникальные характеристики. Тест может только указать на наличие антител в крови, которые косвенно свидетельствуют о присутствии инфекции в организме человека.

В то же время, следует отметить, что ИФА — это метод, который предоставляет крайне точные результаты, но при этом не является самым дешевым. Поэтому, для того чтобы убедиться в качественной диагностике и правильной интерпретации результатов, важно обращаться к ИФА с умом и только при необходимости, а также только квалифицированный врач может заниматься интерпретацией полученных результатов.

Выявляемые заболевания и показания к назначению ИФА анализа

Имеется огромный список показаний к проведению ИФА анализа. Ниже представлены наиболее часто встречающиеся цели анализа:

• Диагностика острых и хронических инфекционных заболеваний. В этом случае проводится анализ на наличие IgM и IgG антител к различным вирусам, в числе которых гепатиты A, B, C, D и E, ВИЧ, цитомегаловирусная инфекция, вирус Эпштейна — Барр, герпес и токсоплазмоз. Также ИФА проводится для выявления IgM и IgG антител к кори, краснухе, сальмонеллезу, дизентерии, клещевому энцефалиту и другим инфекциям, а также для выявления IgG антител к паразитарным заболеваниям и IgM и IgG антител к инфекциям, передающимся половым путем. Еще одним показанием является анализ на IgG к хеликобактерной инфекции.
• Оценка наличия маркеров некоторых аутоиммунных заболеваний.
• Выявление онкологических маркеров, таких как простатспецифический антиген, раково-эмбриональный антиген и др.
• Определение содержания гормонов в сыворотке крови, включая прогестерон, пролактин, тестостерон, тиреотропный гормон и другие.

Один из основных биоматериалов, используемых для ИФА (иммуноферментного анализа) - сыворотка крови. Из образца крови, взятого из вены пациента, в лаборатории удаляются форменные элементы, которые могут затруднять проведение анализа. В случае диагностики других заболеваний, таких как инфекции, анализ проводится с использованием спинномозговой жидкости, околоплодных вод, мазков слизистых оболочек и т.д.

Для получения точных результатов рекомендуется сдавать кровь натощак. Если целью является диагностика хронических, скрыто протекающих инфекционных заболеваний, за две недели до тестирования следует отказаться от приема антибиотиков и противовирусных препаратов. Такие меры помогают избежать возможных искажений в результатах анализа.

Статья о сроках готовности результатов ИФА

Чтобы получить результаты анализа ИФА, потребуется немного времени и организации со стороны лаборатории. Однако, при наличии всех необходимых реактивов и хорошей организации, результаты анализа можно будет получить уже через один или два дня после взятия крови от пациента.

В некоторых экстренных случаях, когда необходим результат анализа ИФА как можно быстрее, вы можете получить его в течение двух или трех часов. Однако, чтобы это произошло, требуется от лаборатории дополнительная тщательность и внимание к каждой детали.

Пояснительной информацией по иммуноферментному анализу (ИФА) является, что его качественный результат сохранит однозначный ответ, который сообщит, найдено ли искомое вещество в образце или же нет. Если речь идет о количественном анализе на основе ИФА, то концентрацию можно выразить численным значением или в виде соответствующего количества знаков "+" (которых может быть от одного до нескольких).

Фото: freepik.com